出品公司:	ATCC
細(xì)胞名稱:	ATCC CRL-1555~A-431~人表皮癌細(xì)胞
存儲人:	DJ Giard, SA Aaronson
種屬來源:	人
組織來源:	皮膚
疾病特征:	皮膚癌
細(xì)胞形態(tài):	上皮細(xì)胞樣
生長特性:	貼壁生長
培養(yǎng)基:	DMEM培養(yǎng)基(GIBCO,貨號12800017)，90%；FBS，10%。
產(chǎn)品目錄號:	CRL-1555
生長條件:	氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%; 溫度：37 ℃,
傳代方法:	1：2至1：6，每周2次。
凍存條件:	90% 完全培養(yǎng)基+10% DMSO，液氮儲存
支原體檢測:	陰性
**等級:	1
應(yīng)用:	該細(xì)胞可以作為轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞。
STR:	Amelogenin: X CSF1PO: 11,12 D13S317: 9,13 D16S539: 12,14 D5S818: 12,13 D7S820: 10 THO1: 9 TPOX: 11 vWA: 15,17
同工酶:	AK-1, 1 ES-D, 1 G6PD, B GLO-I, 2 Me-2, 0 PGM1, 1 PGM3, 1
聯(lián)系方法:	何經(jīng)理，合肥星肽生物科技有限公司，Tel：0551-63802898 400-8702-898 E-mail：info@qingbio.com 網(wǎng)址：http://www.k85n.com QQ:514713116

ATCC CRL-1555~A-431~人表皮癌細(xì)胞特點(diǎn)和簡介

皮膚癌細(xì)胞株A-431源自一位85歲女性，是D.J.Giard等人建立的一系列細(xì)胞株中的一株。它在抗胸腺細(xì)胞球蛋白、血清處理的NIH 瑞士小鼠中形成類似于惡性黑素瘤的快速增長的皮下腫瘤，在普通成纖維細(xì)胞和瓊脂上形成克隆。這是一個超三倍體人細(xì)胞株。在本庫通過支原體檢測。在本庫通過STR檢測。

ATCC CRL-1555~A-431~人表皮癌細(xì)胞接受后處理

1) 收到ATCC CRL-1555(A-431)細(xì)胞后，請檢查是否漏液，如果漏液，請拍照片發(fā)給我們。
2) 請先在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長狀態(tài)，去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3) 棄去T25瓶中的培養(yǎng)基，添加 6ml本公司附帶的完全培養(yǎng)基。
4) 如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%請及時進(jìn)行細(xì)胞傳代，傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的完全培養(yǎng) 基。
5) 接到ATCC CRL-1555(A-431)細(xì)胞次日，請檢查細(xì)胞是否污染，若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染，請及時與我們?nèi)〉寐?lián) 系。

ATCC CRL-1555~A-431~人表皮癌細(xì)胞培養(yǎng)操作

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL ATCC CRL-1555(A-431)細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入 4mL 培養(yǎng)基混合均勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng) 過夜）。**天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待ATCC CRL-1555(A-431)細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞，根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入血清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細(xì)胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

ATCC CRL-1555~A-431~人表皮癌細(xì)胞培養(yǎng)注意事項(xiàng)

1. 收到ATCC CRL-1555(A-431)細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn) 象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等，確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致。若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題，責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。
3. 用 75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題貼壁細(xì) 胞會有少量從瓶壁脫落，將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng) 4~6 小時,再取出觀察。此時多數(shù)細(xì)胞均會貼壁，若細(xì)胞仍不能貼壁請用臺盼藍(lán) 染色測定細(xì)胞活力，如果證實(shí)細(xì)胞活力正常，請將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng)；如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無活力，請拍下照片及時和我們聯(lián)系，信息確認(rèn)后我們?yōu)?您再免費(fèi)寄送一次。
4. 靜置細(xì)胞貼壁后，請將細(xì)胞瓶內(nèi)的培養(yǎng)基倒出，留 6~8mL 維持細(xì)胞正常培養(yǎng)，待ATCC CRL-1555(A-431)細(xì)胞匯合度 80%左右時正常傳代。
5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶內(nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用，細(xì)胞傳代時可以一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合，使細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件。
6. 建議客戶收到ATCC CRL-1555(A-431)細(xì)胞后前 3 天各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和 ******* 技術(shù)部溝通交流。由于運(yùn)輸?shù)脑?，個別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，告知細(xì)胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。
7.該細(xì)胞僅供科研使用。

合肥星肽生物科技有限公司作為美國ATCC專業(yè)代理商，專業(yè)經(jīng)營ATCC菌種、ATCC原代細(xì)胞、培養(yǎng)基、抗體、生物試劑、耗材等，我公司和ATCC共同努力致力于為客戶提供可靠的研究材料以及方便快捷的服務(wù)，對購買項(xiàng)目的前期資料提供,中期合同保證,后期貨物跟蹤到*終售后的確保項(xiàng)目準(zhǔn)確到位，都有相關(guān)專業(yè)人士進(jìn)行維護(hù),確保您在我公司獲得*上等服務(wù)！